V. vinifera ve C. spinosa ekstraktlarının hepatosellüler karsinom üzerindeki in vitro etkileri
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Sağlık Bilimleri Üniversitesi, HAMİDİYE SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ, TIBBİ BİYOKİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2023
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: FATMA SENA DUMLU
Danışman: Eray Metin GÜLER
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Amaç: Hepatoselüler karsinom (HSK), en yaygın primer karaciğer malignitesidir ve dünya çapında kansere bağlı ölümlerin önde gelen nedenidir. Bitkisel ilaçlarda bulunan bileşiklerin çeşitli doku hücreleri üzerinde antioksidan ve prooksidan etkileri olduğu gösterilmiştir. Çalışmamızın amacı Vitis vinifera (V. vinifera) ve Capparis spinosa (C. spinosa)'nın hepatoselüler karsinom ve sağlıklı hepatositler üzerindeki etkilerini in vitro olarak değerlendirmektir. Gereç ve Yöntem: C. spinosa bitkisinin kuru ve yaş tomurcukları ve V. vinifera'nın çekirdeği farklı çözücülerle ekstrakte edilmiştir. Ekstraktların total fenol, total flavonoid, total antioksidan içerik analizleri gerçekleştirilmiştir. Ekstraktlar insan hepatoselüler karsinomu (HepG2) ve sağlıklı hepatosit (THLE-2) üzerinde in vitro olarak çalışılmıştır. Hücreler, farklı konsantrasyon değerlerindeki C. spinosa ve V. vinifera ekstraktları (62,25-3000 μg/mL) ile 24 saat inkübe edilip hücre canlılığı ATP testi ile lüminometrik olarak ölçülmüştür. Sitotoksik etkisi en iyi olan ekstraktlarla deneylere devam edilmiştir. Hücre içi reaktif oksijen türlerinin (ROS) seviyeleri 2',7'-dikhloro-dihidrofluoresin-diasetat (H2DCF-DA) floresan probuyla florometrik olarak, mitokondriyal membran potansiyeli (MMP) 3,3' diheksiloksakarbosiyanin iyodür (DiOC6(3)) boyasıyla florometrik olarak, hücre içi kalsiyum seviyeleri Fura-2AM boyasıyla, hücre içi glutatyon düzeyleri lüminometrik olarak, apoptoz akridin turuncusu/ etidyum bromür (AT/EB) çift boyası ile floresans mikroskopta ve DNA hasarı alkalen tek hücre jel elektroforezi yöntemi ile analiz edilmiştir. Bulgular: Deney sonuçlarında C. spinosa ve V. vinifera ekstraktlarının hepatoselüler karsinom hücrelerinde ve sağlıklı hepatositlerde artan konsantrasyonlarına bağlı olarak sitotoksisiteyi arttırdığı bulunmuştur. HepG2 ve THLE-2 hücrelerinde hücre içi ROS ve hücre içi kalsiyum seviyeleri artmış, MMP ve hücre içi glutatyon düzeyleri ise azalmıştır. Bunların sonucunda apoptoz ve DNA hasarı indüklenmiştir. HepG2 hücreleri THLE-2'ye kıyasla hücre içi ROS ve hücre içi kalsiyum seviyelerinde istatistiksel anlamlı olarak daha fazla artış göstermiştir. MMP ve hücre içi glutatyon düzeylerinde ise istatistiksel anlamlı olarak daha fazla azalma göstermiştir. Sonuç: Çalışmamızla C. spinosa ve V. vinifera ekstraktlarının HepG2 ve THLE-2 üzerinde sitotoksik ve apoptotik etkileri olduğu ortaya koyulmuştur. Ancak bitkilerin detaylı olarak araştırıldığı daha fazla in vitro çalışmalara ihtiyaç vardır.