Akım sitometride CD45, CD3, CD19 hücre yüzey antijenleri için metot validasyonu prosedürünün uygulanması
Tezin Türü: Tıpta Uzmanlık
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Sağlık Bilimleri Üniversitesi, HAMİDİYE ULUSLARARASI TIP FAKÜLTESİ, TEMEL TIP BİLİMLERİ BÖLÜMÜ, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2023
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: REYHAN IŞIK
Danışman: Berrin BERÇİK İNAL
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Amaç: Cluster of differentiation (CD) 45, CD3 ve CD19 hücre yüzey antijenleri ile yapılan akım sitometrik analizin istenen amaca uygun nitelikte sonuç verdiğinin test edilmesi ve akım sitometri metot validasyonu prosedürünün uygulama basamaklarının gösterilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Periferik tam kan numunelerinde CD45, CD3 ve CD19 hücre yüzey antijenleri için analitik kesinlik, duyarlılık çalışmaları, stabilitenin belirlenmesi, bulaş değerlendirmesi ve referans aralık verifikasyonu yapıldı. Ölçümler, BD FACSLyric™ Clinical Cell Analyzer (Becton, Dickinson and Company BD, USA) cihazı ile yapıldı. Analizlerde CD45'in göreceli yüzdesi ve hücre sayısı (event) lökosit kapısı içinden verilirken, CD3 ve CD19'a ait değerler lenfosit kapısı içinden verildi. Bulgular: CD45, CD3 ve CD19 için yapılan analitik kesinlik ve işlenmiş numune stabilitesi çalışmalarından elde edilen sonuçların tamamı kabul kriterlerini karşıladı. Hücre sayısı açısından limit of blank (LoB)-limit of detection-(LoD) değerleri sırasıyla CD 45 için 71,48-92,54; CD3 için 8,24-11,95; CD 19 için 0,55-0,94 olarak bulundu. Hücre sayısı açısından lower limit of quantitation (LLoQ) değerleri CD45, CD3 ve CD19 için sırasıyla 146, 34 ve 27 idi. Mutlak lenfosit sayısı LLoQ değerleri CD3 ve CD19 için sırasıyla 1,86 ve 1,98 hücre/μl idi. Referans aralık verifikasyon çalışmasında, mutlak CD3 pozitif hücre sayısı için 725-2960 hücre/μl, CD3'ün lenfositler içindeki yüzde değerleri için %52,30–84,64 referans aralık değerleri kabul edildi. Mutlak CD19 pozitif hücre sayısı için 74-586 hücre/μl, CD19'un lenfositler içindeki yüzde değerleri için % 3,90–20,79 kabul edildi. Sonuç: Tıbbi laboratuvarlarda, geçerliliği kanıtlanmış akım sitometri sonuçları ile doğru tanı konulabilecek, tanıya uygun tedavi verilebilecek ve hastalıklar optimum düzeyde takip edilebilecektir. Akım sitometride metot validasyon çalışmasının planlanması, çalışmanın uygulama biçimi ve sonuçların nasıl raporlandığının detaylı olarak açıklanmasının literatürde yer alabilecek değerli çalışmaların yapılmasına katkı sunabileceğini ve yöntemin gelecekte daha da etkin bir rol oynayabileceğini düşünmekteyiz. Anahtar Kelimeler: akım sitometre, biyobelirteçler, validasyon çalışması, hematolojik maligniteler